本品适用于需要对大肠菌群准确计数的样品,如消毒牛乳、冷饮和调味品等。在计数方面,比传统的MPN值法更加准确。与国标法相对应,将原来几步完成的试验简化为一步,时间由一个星期左右缩短为十几个小时,而且省去了制备培养基和清洗器皿的麻烦,非常适合于生产企业自检和卫生检验部门使用。一、 使用方法:
样品处理:按无菌操作取样品25g(或mL)放入含有225mL无菌水的玻璃瓶内,充分振摇后成为1:10的稀释液,用1mL灭菌吸管吸取1:10的稀释液1mL,注入含有9mL无菌水的试管内,振摇后成为1:100的稀释液,以此类推,做出1:1000等稀释度的稀释液,每次换一支吸管。
样品接种:一般食品选3个稀释度进行检测,含菌量少的液体样品(如消毒牛乳等)可直接用原液检测。将测试片水平放在工作台面上,揭开上面的透明薄膜,用灭菌吸管吸取样品原液或稀释液1mL,均匀加到中央的圆圈内,然后轻轻将上盖膜放下,从中间向周围轻轻推刮,使水分在圆圈内均匀分布,并将气泡赶走。
培养:将加了样的测试片放入自封袋中,正面向上平放在37℃培养箱内培养15-24h。
计数:在测试片培养基上显红色斑点周围有黄晕并且有气泡者为大肠菌群阳性菌落。有红点、黄晕和汽泡是阳性,只有红点和黄晕也是阳性。如果只做原液,则每个测试片上的阳性菌落数即相当于每毫升大肠菌群数;如同时做三个稀释度,则选择有阳性菌落的最高稀释度的测试片进行计数,然后乘以稀释倍数即为样品中每克(毫升)含有大肠菌群数。
注意:如果样品的酸碱度pH7.0以下时,应先用灭过菌的碱性溶液(如0.01mol/LNa2CO3)调节到pH7.0-8.0,否则接种后培养基马上变黄,易造成假阳性结果。
二、 保存条件:
在4-10℃冰箱中,保质期为一年,铝箔袋打开后,未用完的测试片要放回袋中重新封好,放到冰箱中,一个月内用完。
三、 附加说明:
揭开上盖膜,用接种针挑取测试片上的菌落可作进一步的分离和鉴定。使用过的纸片上带有活菌,需及时处理掉。
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